Résumé | Faisant appel à la microscopie de fluorescence, on a étudié la partition de la sonde de lipide marquée d'un colorant, la 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(7-nitro-2-1,3-benzoxadiazol-4-yl, NBD-DHPE, dans des bicouches de lipides séparés par phases coexistentes de fluide ou de liquide ordonné. Cette sonde présente une intensité de fluorescence qui n'est que légèrement supérieure dans le domaine ordonné, elle subit un renversement de contraste qui conduit à une phase fluide beaucoup plus fluorescente en présence de plus de 0,2 % de Texas Rouge-DHPE (TR-DHPE). On a démontré que le changement de contraste résulte d'un transfert d'énergie de résonance de Förster entre le donneur NBD et l'accepteur TR dans la phase fluide qui comporte une concentration de TR qui est approximativement 3 fois plus élevée que dans les autres domaines. Dans le but d'obtenir une augmentation du contraste, on a fait appel à une autre approche impliquant un lipide substitué par un groupe nitroxyde qui se partitionne entre la phase fluide comme désactivant; toutefois, le désactivant a modifié le comportement de la bicouche. La méthode d'énergie de transfert pour augmenter le contraste entre les phases fluides et ordonnées a donc été utilisée pour examiner la morphologie des bicouches traitées par un enzyme. |
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