Résumé | Nous avons utilisé l'hybridation suppressive soustractive (SSH) et le criblage différentiel pour créer une banque d'ADNc enrichie en gènes de l'hôte et de l'agent patholgène régulés en amont à la suite de l'inoculation de feuilles d'abutilon avec le mycoherbicide Colletotrichum coccodes. Un total de 116 EST, représentant des gènes exprimés préférentiellement, ont été analysés; des rôles probables ont pu être attribués à 89 séquences dont la transcription et la traduction, l'énergie, la croissance et le maintien cellulaire, et le stress oxydatif et la défense. Les séquences des EST ont été réunies en 20 contigs et 29 singletons/singlets. À l'exception du contig 26 qui correspondait le plus avec l'Histone 4 fongique, toutes les autres séquences avaient des correspondances maximales avec des séquences végétales. Les gènes associés au stress oxydatif et à la défense formaient la plus grande catégorie avec neuf contigs et trois singlets (ou 48 % des EST). Les protéines du type 3 des métallothionéines (MT) étaient représentées par six contigs, trois singletons et deux singlets. Nous avons aussi identifiés des gènes pour une protéine WRKY et bZIP qui on probablement un rôle dans la trascription, de même que des gènes pour des protéines telles que l'ascorbate peroxydase et la réticuline oxydase. La régulation en amont de sept gènes choisis a été validée par la PCR quiantitative en temps réel. Par rapport aux feuilles non infectées d'abutilon, ces gènes ont été significativement induits par la présence du C. coccodes sur les feuilles d'abutilon. |
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