DOI | Trouver le DOI : https://doi.org/10.1139/m96-110 |
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Auteur | Rechercher : Juck, David; Rechercher : Ingram, Jordan; Rechercher : Prévost, Michèle; Rechercher : Coallier, Josée; Rechercher : Greer, Charles1 |
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Affiliation | - Conseil national de recherches du Canada. Institut de recherche en biotechnologie du CNRC
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Format | Texte, Article |
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Sujet | environmental; nested PCR; sensitive; detection; PCR à l'aide d'amorces imbriquées; sensibilité; détection; eau potable |
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Résumé | Une méthode rapide et sensible de détection des bactéries présentes en faible quantité dans l'eau potable a été développée. Escherichia coli, une bactérie indicatrice de contamination fécale, a été utilisée comme organisme témoin dans le présent protocole de concentration de l'échantillon de l'eau par filtration, suivi d'une réaction en chaîne catalysée par polyméase (PCR) à l'aide d'amorces imbriquées dont les produits ont été visualisés par coloration au bromure d'éthidium. Deux séries d'amorces ont été conçues à partir du gène β-glucuronidase (uidA) spécifique à E. coli, la première paire d'amorces produisant un fragment de 486 pb utilisé comme matrice pour la deuxième série d'amorces imbriquées délimitant un fragment de 186 pb. Cette technique permet de détector d 1-10 cellules/50mL d'échantillon d'eau entre 6 à 8 h. Cette technique est donc beaucoup plus rapide que les méthodes traditionnelles de cuture bactérienne ou d'hybridation Souther qui requièrent de 2 à 3 jours avant d'obtenir des résultats. |
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Date de publication | 1996 |
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Dans | |
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Langue | anglais |
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Numéro du CNRC | 34557 |
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Numéro NPARC | 3539699 |
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Identificateur de l’enregistrement | ce75604f-3a25-4e60-a76e-8231c13616b6 |
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Enregistrement créé | 2009-03-01 |
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Enregistrement modifié | 2020-03-20 |
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